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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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鱖魚脾腎壞死病毒(ISKNV)PCR檢測方法(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P63977
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P63977
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50次
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產品名稱

規格

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鱖魚脾腎壞死病毒(ISKNV)PCR檢測方法(熒光-PCR)

50T

BK-P63977

異常漢遜酵母變種   石蕊殺菌素鏈霉菌 Streptomyces litmocidini
嗜熱脂肪地芽孢桿菌   淺灰鏈霉菌 Streptomyces griseolus
銅綠假單胞菌CMCC10104凍干粉   蘇云金芽胞桿菌亞毒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. subtoxicus
間型酒香酵母   香菇
肉葡萄球菌   島青霉
異型酒香酵母   銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)
 葡萄芽假絲酵母
實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,43,2。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

小鼠心肽(ANP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Metamizole 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S

小鼠心肽(ANP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Mesterolone 中文名:甲氫 分子式:C20H32O2 度:98.0%

小鼠心素(mouse ANP) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Mestanolone 中文名:美雄諾龍 分子式:C20H32O2 度:98.0%

小鼠心素 英文名稱: aialnaiureticpeptide 規格: 48T/96T 英文縮寫: ANP  Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  139481-28-0 中文名: 分子式:C22H17N3O4 度:98.0% 關鍵詞:

小鼠心肌轉錄因子GATA4ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Metamizole   68-89-3 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 度:98.0% 關鍵詞:
C127 小鼠細胞 102(>97.0%(HPLC)(N))質量規格:>97.0%(HPLC)(N)Coumarin 102

FCGR3A Others Human  CD16a / FCGR3A 細胞裂解液 (陽性對照)  314(>98.0%(HPLC)(N))質量規格:>98.0%(HPLC)(N)Coumarin 314

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化);PC-12(高分化)異環1酰胺質量規格:>99%,USP,BR,可用于細胞培養Ifosfamide

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 細胞裂解液 (陽性對照) 異環1酰胺(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Ifosfamide

KYSE450 鹽酸普拉克索質量規格:>99%,EP6.8Pramipexole 2HCL monohydrate
XCL1 Protein Mouse 重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標簽)羅漢樹脂酚-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品)Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside質量規格:HPLC98%,標準品

RBE(細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 細胞裂解液 (陽性對照) 石蕊Litmus質量規格:AR

小細胞細胞;NCI-H2097-O-甲基蘆薈新甙A(標準品)7-O-Methylaloeresin A質量規格:HPLC98%,標準品

PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 細胞裂解液 (陽性對照) 肉蓯蓉苷A(標準品)Cistanoside A質量規格:HPLC98%,標準品

CL-0449SW 780(膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2蘆薈新甙D(標準品)Aloeresin D質量規格:HPLC98%,標準品
Zolpidem    中文名:坦 分子式:C19H21N3O 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠卵泡休止素 英文名稱: Mouse Follistatin 規格: 48T/96T 英文縮寫: FST

Zolmitriptan  139264-17-8  中文名:佐米曲普坦 分子式:C16H21N3O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠叉頭框蛋白O3 英文名稱: Mouse Forkhead Box protein O3 規格: 48T/96T 英文縮寫: FOXO3

Zileuton  111406-87-2  中文名:齊留通 分子式:C11H12N2O2S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGLELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Zidovudine  30516-87-1  中文名:齊多夫定 分子式:C10H13N5O4 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脂多糖(LPSELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Xanthorin  17526-15-7  中文名: 分子式:C16H12O6 度:% 關鍵詞: 抗菌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
鱖魚脾腎壞死病毒(ISKNV)PCR檢測方法(熒光-PCR法)實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR


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