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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人病毒8型染料法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P64654
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2021-01-12
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P64654
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

人病毒8型染料法熒光定量PCR試劑盒

50

BK-P64654

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 76,5,4,3,2
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實時熒光定量PCRquantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

3T3-Swiss albino細胞,胚胎成纖維細胞 人*癌細胞,CRL細胞 CM-M048小鼠腸巨噬細胞完全培養(yǎng)基100mL活性腸肽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRVasoactive Intestinal peptide

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-EZ-Ala-Ala-Leu-pNA質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRZ-Ala-Ala-Leu-pNA

IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 (陽性對照) 三亞甲基碳酸酯質(zhì)量規(guī)格: 度≥99%TMC

內(nèi)膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)碳酸錳(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRManganese (II) carbonate

CDON Others Human 人 CDON / CDO 人細胞裂解液 (陽性對照) 硝酸鈀質(zhì)量規(guī)格:BRPalladium (II) nitrate dihydrate
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)天青II曙紅質(zhì)量規(guī)格:BSAzure II eosinate

AL7P/HL-60R細胞,原髓細胞細胞 615小鼠T細胞性瘤株,L7712細胞 孔雀綠1酸鹽檢測試劑盒MGmP菲律賓菌素;非律平;Filipin質(zhì)量規(guī)格:sigma分裝Filipin complex from Streptomyces filipinensis

NCI-H520(肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2天青I;天青B質(zhì)量規(guī)格:BSAzure I

C4-2(細胞) 5×106cells/瓶×2 T-111B木瓜蛋白酶(100mL酶解緩沖液)10mL 結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]天青II質(zhì)量規(guī)格:BSAzure II

白鰱尾鰭細胞系;SCF天青A質(zhì)量規(guī)格:BSAzure A chloride
胎兒細胞完全培養(yǎng)基 100mL卡拉膠Carrageenan質(zhì)量規(guī)格:粘度≥0.005 pa.s

MDCK細胞,狗腎細胞 AAV-293( 胚腎細胞) 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5普侖司特Pranlukast質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (Fc 標簽)1酸美托洛爾Metoprolol tartrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

WI-38(胚肺細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠癌細胞;CCC-Ca761-031酸美托洛爾(標準品)Metoprolol tartrate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

少突膠質(zhì)前體細胞-懸浮生長裂解物HOPC-os L阿拉伯膠Arabic gum質(zhì)量規(guī)格:>99%,醫(yī)藥級
PVR Others Mouse 小鼠 CD155 / PVR 人細胞裂解液 (陽性對照) wo7iumDODECYLSULFATE十二烷基鈉蛋白組學級白色至米白色精細粉末RTsigma

人胚肺二倍體細胞;KMB-17亮綠瓊脂 BRILLIcNT GRqqN cGcR MODIFIqD FOR

DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b (aa 422-855) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)  (III) Sudan III (certified by the Biological... 85-86-9 5G 染色劑

CL-0355HFT-8810(人胎兒胸腺細胞株)5×106cells/瓶×2檸檬酸鐵shēng huà shì jì容量:5

CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 人T細胞瘤,Jurkat E6-1細胞 THLE-3(人肝上皮細胞)ProtaminSulfate 1g/5g/25g/100g 原裝 Sigma P4380

人病毒8型染料法熒光定量PCR試劑盒本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

聯(lián)系方式
手機:13564080845
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