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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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病毒H3N2亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63214
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2021-01-07
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63214
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

病毒H3N2亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63214

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D  Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  171422-82-5  中文名:  分子式:C56H90O19  度:97.5%  關(guān)鍵詞:  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

內(nèi)皮生長因子 D(VEGF-D)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  中文名:  分子式:C56H90O19  度:98.0%

內(nèi)皮生長因子 C(VEGF-C)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender  Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  中文名:  分子式:C56H90O19 

內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender  Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  中文名:  分子式:C56H90O19  度:97.5%

內(nèi)皮生長因子 A(VEGF-A)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝     Androstanolone 17-benzoate  中文名:雄諾龍苯甲酸酯  分子式:C26H34O3
TNFSF13B Others Human  BAFF / TNFSF13B 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 試劑質(zhì)量規(guī)格:ARDithizone

tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3鎂試劑I質(zhì)量規(guī)格:ARMagnesonI

CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鉭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mlTantalum standard

BT474 導(dǎo)管癌細(xì)胞碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mlTellurium standard

WI-38胚肺細(xì)胞 WI-38 in human embryo lung cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCl)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:10%HClTerbium standard
293E(胚腎細(xì)胞(EBNA1基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 原代神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml精胺氮氧化加合物Spermine NONOate質(zhì)量規(guī)格:美國進口

絨毛膜內(nèi)皮細(xì)胞HVCEC精胺二1酸鹽Spermine diphosphate salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口

PDE2A Others Human  PDE2A / CGS-PDE (aa 215-900) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 雷尼替丁-N,S-二氧化物Ranitidine-N,S-dioxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7去甲基雷尼替丁Desmethyl Ranitidine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

Ha Fe細(xì)胞,羊膜細(xì)胞 高分化腺癌細(xì)胞系,THC-8307細(xì)胞 CM-R045大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL雷尼替丁N-氧化物Ranitidine N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
6-Aminoindole  中文名:6-氨基吲哚  分子式:C8H8N2    AmmoniumChloride   500g              

6-Aminoindazole  中文名:6-氨基吲唑  分子式:C7H7N3    乙二醇-雙-(2-基乙基)四乙酸   10g

6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid  中文名:6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸  分子式:C10H9NO4S    EGTA   50g

病毒H3N2亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone  中文名:6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮  分子式:C9H9NO3    伊紅Y   25g

6-Amino-1-methyluracil  中文名:  分子式:C5H7N3O2    EosinY,Salt   10x25g
實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR


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