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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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斑點熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:BK-P63670
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-12-08
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 帛科
貨號 BK-P63670
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產品名稱

規格

貨號

斑點熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)

50T

BK-P63670

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 765432
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNARNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Candesartan methyl ester  139481-69-9  中文名:  分子式:C25H22N6O3 

小鼠白介素-13   英文名稱:    ierleukin-13   規格:   48T/96T   英文縮寫:   IL-13  Cefotaxime   中文名:頭孢噻肟鈉  分子式:C16H17N5NaO7S2 

小鼠白介素-12(mouse IL-12)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  Candesartan ethyl ester  139481-58-6  中文名:  分子式:C26H24N6O3  度:98.0%  關鍵詞: 

小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Candesartan ethyl ester  中文名:  分子式:C26H24N6O3  度:98.0%

小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Candesartan ethyl ester  中文名:  分子式:C26H24N6O3
VTN Protein Mouse 重組小鼠 Vionectin / VTN 蛋白 (His 標簽)(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)(III)(98%(T))質量規格:>98%(T)Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III)

永生化表皮細胞;HaCaT 上皮細胞完全培養基 100mL(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)(III)(95%(T))質量規格:>95%(T)Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III)

THP-1單核細胞四丁基化銨(離子對色譜級)質量規格:離子對色譜級Tetrabutylammonium iodide

HGF Others Cynomolgus 食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 細胞裂解液 (陽性對照) 三辛胺(離子對試劑)質量規格:離子對試劑Trioctylamine

羊膜細胞;WISH草酸鈉容量分析用溶液標準物質(0.05M)質量規格:0.05M oxalate solution
Hs 578T(癌細胞) 5×106cells/瓶×2甲硝唑雜質A2-甲基-5-硝基咪唑)標準品2-Methyl-5-nitroimidazole質量規格:檢查

Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(細胞分離液) 500ml硫酸雙肼屈嗪(標準品)Dihydralazine sulphate質量規格:含量測定

前脂肪細胞-內臟裂解物HPA-v L鹽酸阿米替林(標準品)Amitriptyline HCl 質量規格:含量測定

CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 異丙托溴銨(標準品)IPRATROPIUM BROMIDE質量規格:含量測定

綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP賴氨匹林(標準品)DL-Lysine Acetylsalicylate質量規格:UV法含量測定
1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene  1806-34-4  中文名:1,4-(5-苯基-2-惡唑基)  分子式:C24H16N2O2  度:98.0%      小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(mouse PAP)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝

1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene  5089-22-5  中文名:1,4-(2-苯并惡唑基)  分子式:C24H14N2O2  度:98.0%      小鼠血小板相關抗體IgG(mouse PAIgG)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  

1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  4442-54-0  中文名:1,4-苯并二氧六環-6-羧酸  分子式:C9H8O4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene  2479-46-1  中文名:1,3-(4-氨苯氧基)  分子式:C18H16N2O2  度:98.0%      小鼠雌二醇受體(ER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

斑點熱立克次體PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene  34052-90-9  中文名:1,3-(4,5-二氫-2-惡唑)  分子式:C12H12N2O2  度:98.0%      小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

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