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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4241 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
無綠藻通用PCR檢測試劑盒直銷 | Prototheca spp.PCR | BKP4241 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
3-Amino-3-phenylpropionic acid 614-19-7 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2 二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)試劑盒 紫外分光光度法 25管/24樣
6-Aminopenicillanic acid 551-16-6 中文名:6-氨基青霉烷酸 分子式:C8H12N2O3S 漆酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣
3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 16691-43-3 中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S 天青B 1g
4-Amino-3-hydroxybenzoic acid 2374-03-0 中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 AzureB 5g
3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 1571-72-8 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 桿菌肽 50KU
人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzylsuccinic acid 3972-36-9 中文名: 分子式:C11H12O4
人谷胱甘肽(GSH)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzylacrylic acid 中文名: 分子式:C10H10O2 度:98.0%
人干細胞因子受體(SCFR)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 度:98.0%
人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4
人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISAKit ELISA. 96T/48T 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 中文名: 分子式:C11H13N3S
無綠藻通用PCR檢測試劑盒直銷SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D-鳥氨酸鹽酸鹽質量規格:>98%,BRD-Ornithine monohydrochloride
人間充質干細胞(肝臟)cDNAHMSC-hp cDNAD-苯丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽質量規格:0.98H-D-Phe-OtBu.HCI
U937細胞,組織細胞瘤 人肺巨細胞癌(PG)的低轉移亞系,PG-LH7細胞 腸動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-脯氨酸質量規格:>98%,BRD-Proline
犬源細胞D-苯丙氨酸質量規格:>99%,BRD-Phenylalanine
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細胞裂解液 (陽性對照) D-丙氨酸質量規格:>98%,BRD-Alanine
CM-R064大鼠上皮細胞完全培養基100mL2,2'-二氨基-4,4'-雙噻唑(>98.0%(HPLC)(T))質量規格:>98.0%(HPLC)(T)2,2'-Diamino-4,4'-bithiazole
小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3 小鼠腸動脈內皮細胞完全培養基 100mL1H-咪唑-4,5-二羧酸(>97.0%(HPLC)(T))質量規格:>97.0%(HPLC)(T)1H-Imidazole-4,5-dicarboxylic Acid
MN-h, 小鼠海馬神經元 Mouse2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))質量規格:>98.0%(GC)(T)2,6-Naphthalenedicarboxylic Acid
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-萘二羧酸(>95.0%(T))質量規格:>95.0%(T)1,4-Naphthalenedicarboxylic Acid
人細胞;MGC-8031,4-雙(三甲基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))質量規格:>99.0%(GC)1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne
特點優勢:
1. 特異性:無綠藻通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。