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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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小鼠髓樣單核細胞現貨供應
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:AE0732
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0732
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 白血病;BALB/c
細胞形態 懸浮
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 詳見說明書
物種來源 小鼠
包裝規格
純度 %
是否進口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱: 小鼠髓樣單核細胞現貨供應
簡稱:WEHI-3B

種屬:小鼠

來源:;BALB/c

培養基:1640

狀態:懸浮

產品規格:

單位:

貨號:AE0732

使用方法:
收到細胞小鼠髓樣單核細胞現貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1.
取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2.
待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3.
細胞傳代
1)
吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入375% CO2細胞培養箱中培養;
4)
待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。


實驗操作:
1
、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4
、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8
、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9
、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養瓶。
10
、培養:放置于375% CO2培養箱中。

操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1
)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優質胎牛血清,10%
2
)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養箱濕度為70%-80%
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

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