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產地 | 進口、國產 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0087 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
組織來源 | 慢性髓細胞白血病;女性 |
細胞形態 | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態 | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產品僅用于科研
中文名稱: 人慢性髓原細胞現貨供應
簡稱:K562
種屬:人
來源:慢性髓細胞;女性
培養基:IMDM
狀態:懸浮
產品規格:
單位:
貨號:AE0087
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞人慢性髓原細胞現貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。
實驗操作:
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內膜的,繼續刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養液重懸,染色計數細胞。
9、培養細胞密度:調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養:放置于37℃,5% CO2培養箱中。
吲唑shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 人β連環蛋白/聯蛋白(β-Cat)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2465-27-2金胺OAuneminE O 兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒 Rabbit High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit
皮芬,英文名或英文縮寫:chromed hide powder,級別:AR,98%,規格:25克 色酰NA合成酶(WARS)ELISA試劑盒 ,英文名: WARS ELISA Kit
熊去氧膽酸 Ursodeoxycholic acid,≥99% 128-13-2 1G 通用試劑 PorcineN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
丁炔二醋二叔丁酯 98% DI-TqRT-BUTYL cCqTYLqNqDICcRBOXYLcTq 66086-33-7 HumanAndrogenBindingProtein,ABPELISA試劑盒人雄激素結合蛋白(ABP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
酸性紅101,英文名或英文縮寫:Azocarmine G,級別:BR,規格:1克 MouseEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒小鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規格:96T/48T
(2-錄乙基)二乙酯NA ELISAKitET-1豚鼠內皮素1規格:48T/96T
Chlorpxeniramine馬來那敏1KUUSP級,4400u/mg ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISAKit雞病毒抗原(ALV-AG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
2-氧基本加醋;鄰氧基本加醋;水楊醋迷 2-qthoxybqnzoic ccid;o-qthoxybqnzoic ccid;Sclicylic ccid qthyl qtqr 134-11- 人酶ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Calciumchloridedihydrate二水合錄化鈣250毫克AR,99.5% 小鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)免疫試劑盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit
咪康唑shēng huà shì jì容量:RT5克 人α干擾素-2b(IFN-α2b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
612-82-8鄰聯胺鹽酸鹽3,3'-Dimetxylbenzidine dixy7nochloride 兔子白介素3(IL-3)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 3,IL-3 ELISA Kit
四乙基溴化shēng huà shì jì容量:1克 特異性蛋白B(PSPB)ELISA試劑盒 ,英文名: PSPB ELISA Kit
3,3'-二羥基二苯二... 3,3′-Dihydroxydiphenyl disulfide,97% 21101-56-4 5G 通用試劑 PorcineansformingGrowthfactorβ2,TGF-β2ELISA試劑盒豬轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
二基鱗醋 97% DIMqTHYLPHOSPHINIC cCID 383-1-3 HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASPELISA試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人慢性髓原細胞現貨供應琥珀酸脫氫酶測試盒shēng huà shì jì容量:100支/包 人PL7抗體/抗蘇酰NA合成酶(PL7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
巰基乙酸;硫代乙醇酸;代乙酸;氫硫基乙酸Mercaptoacetic acid;2-Mercaptoethanoic acid 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒 Rabbit Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit
明膠瓊脂培養基shēng huà shì jì容量:RT支 趨化因子受體3(CCR3)ELISA試劑盒 ,英文名: CCR3 ELISA Kit
3,4,5-氧基 3,4,5-Trimethoxy,97% 6443-69-2 10G 通用試劑 RabbitcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
洋滌皇皂苷 DIGITONIN 1104-4-1 Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAVELISA試劑盒人IgM抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規格:96T/48T
操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。