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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 大鼠細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng)：UMR-106

種屬：大鼠

來(lái)源：；SD大鼠

培養(yǎng)基：McCoy’s *

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號(hào)：AE0258
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞大鼠細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene  中文名：1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯  分子式：C12H12N2O2    小鼠烷B2(mouse TXB2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  中文名：  分子式：C9H16O6    小鼠組織多肽抗原(mouse TPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

1,2-Cyclohexanedicarboximide  中文名：  分子式：O2    小鼠血小板生成素(mouse TPO)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

1,2-Bis(phenylthio)ethane  中文名：1,2-雙(苯硫基)乙烷  分子式：C14H14S2    小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(mouse AIL/APO 2L)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

1,2-Bis(3-indenyl)ethane  中文名：1,2-雙(3-茚基)乙烷  分子式：C20H18    小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(mouse AIL R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1   英文名稱(chēng)：   vascuiar endothelial growth factor receptor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   VEGF-R1  Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate  32249-35-7  中文名：  分子式：C7H10O3 

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(mouse VEGF-D)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  114772-38-2  中文名：  分子式：C15H13BrO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D   英文名稱(chēng)：   vascuiar endothelial growth factor D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   VEGF-D  Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate  32249-35-7  中文名：  分子式：C7H10O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H14O2  度：98.0%

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  中文名：  分子式：C15H13BrO2
Atrazine  1912-24-9  中文名：阿特拉津  分子式：C8H14ClN5    山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

D(-)-Arginine  157-06-2  中文名：D-精氨酸  分子式：C6H14N4O2    山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benserazide   14919-77-8  中文名：鹽酸芐絲肼  分子式：C10H16ClN3O5    山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Trenbolone heptanoate  N  中文名：  分子式：C25H34O3    山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide  66304-01-6  中文名：3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物  分子式：C7H4O3S2    山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
大鼠細(xì)胞特價(jià)熱休克蛋白 27(HSP27)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Panaxydiol  中文名：  分子式：C17H24O2 

曲拉通X-100   100ml  3-Amino-4-hydroxybenzoic acid  中文名：3-氨基-4-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

羥自由基檢測(cè)   Hydroxyl radical detection  Rasagiline mesylate  中文名：甲磺酸雷沙吉蘭  分子式：3S 

羥脯酸測(cè)試前處理試劑   Preeatme reage hydroxyproline test  Rengynic acid  中文名：  分子式：C8H14O4 

羥脯酸（Hyp）測(cè)試盒   Glamine syhetase (GS) test kit                 Rengynic acid  517883-38-4  中文名：  分子式：C8H14O4
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。