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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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SK-MES-1/DDP
  • 品牌:帛科
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:CE039
  • 價格: ¥1910/株
  • 發布日期: 2020-10-19
  • 更新日期: 2025-03-14
產品詳請
產地 進口、國產
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 CE039
用途 公司產品僅用于科研
組織來源
細胞形態 詳見說明書
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態 貼壁
物種來源 Human
包裝規格 1×10E6T25/管
純度 詳見說明書%
是否進口

注意事項:
1.使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結構,以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時*戴上手套操作。
2.
不宜將凍存細胞放置在0-60這一溫度范圍內過久,低溫損傷主要發生在這一溫度區內,是危險溫區
3.
注意定期檢查液氮罐內液氮量,及時添加。

產品名稱

SK-MES-1/DDP

單位

貨號

CE039

產品簡稱:SK-MES-1/DDP
產品名稱:人肺鱗癌細胞鉑耐藥株

規格:1×10E6T25/

種屬:Human

貨號:CE039

細胞的凍存:
1.先將凍存管放入4冰箱,約40min
2.
接著置于-20冰箱,約30-60min
3.
置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.
置于液氮罐中長期保存。
5
產品僅用于科研同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

具體步驟:
SK-MES-1/DDP. 水的制備:
帛科細胞培養用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:HanksD-Hanks液的配制)
1.
溶解定容:將藥品(NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4·H2O 1.56gKH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.
移入溶液瓶內待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內,蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補充蒸發掉的水份。
. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH8.0、溫度為37時,胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+Mg2+BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
1.
稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調PH7.2左右)或PBSD-hanks)液中。攪拌混勻,置于4內過夜。
2.
用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20保存以備使用。

細胞計數:
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數槽上。
2.
制備計數用的細胞懸液:用吸管吸5滴細胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍染液(0.4%)或苯胺黑,活細胞不會被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區別活細胞和死細胞。
3.
將細胞懸液滴入計數板:將待測細胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.
統計四個大格的細胞數:將血球計數板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動計數板,當看到鏡中出現計數方格后,數出四角的四個大鉻(每個大格含有16個中鉻)中沒有被染液染上色的細胞數目。
5.
計算原細胞懸液的細胞數:按照下面公式計算細胞密度:
(細胞懸液的細胞數)/ml 四個大格子細胞數/4) ×2×104
說明:公式中除以4因為計數了4個大格的細胞數。
公式中乘以2因為細胞懸液于染液是11稀釋。
公式中乘以104因為計數板中每一個大格的體積為:
1.0mm
(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 1ml1000mm3

帛科細胞工廠適用于工業批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業,也適用于實驗室操作和大規模細胞培養。方便實用,有效避免污染。

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SK-MES-1/DDP
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