久久亚洲中文字幕无码_18禁止午夜福利体验区_情人伊人久久综合亚洲_少妇aaa级久久久无码精品片_成人一区二区免费视频

上海帛科生物技術有限公司
   
     
聯系熱線
  • 聯系人:黃先生
  • 電 話:021-60767003
  • 郵箱:2843593679@qq.com

BJ5183-AD-1 電擊感受態細胞培養操作規程

發表時間:2024-04-07
BJ5183-AD-1 電擊感受態細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

操作方法:
1. DH5α感受態細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養至少15小時。

聯系方式
手機:13564080845
主站蜘蛛池模板: 漂亮人妻被中出中文字幕久久| 欧美人与动人物姣配xxxx| 久久精品免视看国产成人| 日日天干夜夜狠狠爱| 亚洲国产精品成人天堂| 性一交一乱一伦在线播放| 国产欧美日韩精品a在线观看| 蜜臀亚洲av无码精品国产午夜.| 午夜肉伦伦影院| 99热这里只有精品免费播放| 久久无码人妻影院| 亚洲av无码一区二区三区人妖| 欧美人和黑人牲交网站上线| 亚洲乱码国产乱码精品精| 少妇泬出白浆18p| 艳妇臀荡乳欲伦交换av1| 天堂www中文在线资源| 日本无遮挡边做边爱边摸| 欧美又黄又嫩大片a级| 黑人巨大跨种族video| 激情影院内射美女| 色偷偷噜噜噜亚洲男人| 久久zyz资源站无码中文动漫| 四虎成人精品永久免费av| 欧美日韩国产综合草草| 久久久久亚洲av无码网站| 亚洲av日韩av男人的天堂在线 | 少妇太爽了在线观看免费视频| 精品国产乱码久久久人妻| 人妻少妇久久中文字幕456| 东京热tokyo综合久久精品| 免费观看又色又爽又湿的视频 | 97夜夜澡人人爽人人| 亚洲精品美女久久久久99| 精品无码一区在线观看| 又嫩又硬又黄又爽的视频| 国自产拍偷拍精品啪啪一区二区| 亚洲 卡通 欧美 制服 中文| 无码色偷偷亚洲国内自拍| 一区二区视频日韩免费| 亚洲av无码码潮喷在线观看|