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F-BL21(DE3) 感受態細胞培養操作規程

發表時間:2022-06-15
F-BL21(DE3) 感受態細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
胎兒表皮角化細胞完全培養基
新生兒表皮角化細胞完全培養基
成人表皮角化細胞完全培養基
胎兒真皮成纖維細胞完全培養基
成人真皮成纖維細胞完全培養基
人皮下脂肪細胞完全培養基
人內臟脂肪細胞完全培養基
人軟骨細胞完全培養基
人表皮黑色素細胞完全培養基
人破骨細胞完全培養基
人皮膚肥大細胞完全培養基
人成骨細胞完全培養基
人脂肪細胞完全培養基
人表皮角質形成細胞完全培養基
人前脂肪細胞完全培養基
人腦動脈血管內皮細胞完全培養基
人腦動脈血管平滑肌細胞完全培養基
人腦靜脈血管內皮細胞完全培養基
人腦靜脈血管平滑肌細胞完全培養基
人腦膜細胞完全培養基
人神經元細胞完全培養基
人神經少突起前質膠質細胞完全培養基
人神經星形膠質細胞完全培養基
人神經小膠質細胞完全培養基


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