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人Tamm-Horsfall蛋白ELISA試劑盒操作流程

發表時間:2022-06-01
人Tamm-Horsfall蛋白ELISA試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

纖維二糖多粘菌素E(CC)瓊脂基礎凍干配套試劑
改良纖維二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)瓊脂基礎 凍干配套試劑
多粘菌素B(氯化鈉多粘菌素B肉湯凍干配套試劑)
亞碲酸鉀(慶大霉素瓊脂凍干配套試劑)
亞碲酸鉀(四號瓊脂凍干配套試劑)
改良纖維二糖多粘菌素B多粘菌素E(mCPC)瓊脂基礎
3%氯化鈉三糖鐵瓊脂
Cary-Blair氏運送培養基(不含瓊脂)
Cary-Blair氏運送培養基
氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎
60g/L氯化鈉蛋白胨水(PW)
慶大霉素瓊脂
3%氯化鈉溶液
我妻氏血瓊脂
3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂
堿性瓊脂
四號瓊脂
TCBS瓊脂
緩沖-甘油氯化鈉溶液
3%氯化鈉堿性蛋白胨水
堿性蛋白胨水
SCDLP液體培養基
營養瓊脂(普通肉湯瓊脂培養基)
含鐵牛奶培養基
亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(SPS)


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