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Ar Qual 感受態(tài)細胞操作方法

發(fā)表時間:2022-03-16
Ar Qual 感受態(tài)細胞操作方法:

1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質粒或連接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
ASIC1/BNaC2/ASIC1A 酸敏感離子通道1抗體
ADAR1 (C-terminus) 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)
AF10 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體
ADCY1 腺苷酸環(huán)化酶1抗體
APC 腺瘤樣息肉抗體
AGPAT1 溶血磷脂酰基轉移酶抗體
ANKS3 錨蛋白重復及SAM結構域蛋白3抗體
phospho-ALK (Tyr1586) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
ACADVL 酰基輔酶A脫氫酶很長鏈抗體
AMSH 信號轉導銜接結合蛋白抗體
ASB3 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗體
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗體
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體
AIM2 干擾素誘導蛋白AIM2抗體
Aquaporine 2 水通道蛋白-2抗體
ABI2 腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結合蛋白抗體
ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體
ARMCX3 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體
ARMCX1 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體
ARMCX2 ARM重復X連鎖蛋白ARMCX2抗體
Apg10 自噬相關蛋白10抗體
ACBD6 酰基輔酶A結合結構域蛋白6抗體
Aminoacylase 1 氨基酰化酶1抗體
Adipose Triglyceride Lipase 脂肪甘油三酯脂酶抗體
phospho-AMPK alpha-1 (Thr172) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體


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