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植物專用蛋白酶抑制劑混合液反應五要素

發表時間:2022-03-01
植物專用蛋白酶抑制劑混合液反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA Kit
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磷酸化真核延伸因子激酶2抗體 大鼠骨鈣素(OT)ELISA Kit
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磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體 大鼠谷胱甘肽S轉移酶θ1(GSTT1)ELISA Kit
核苷轉運蛋白ENT1抗體 大鼠谷胱甘肽S轉移酶P(GSTP1)ELISA Kit
核苷轉運蛋白ENT2抗體 大鼠谷胱甘肽S轉移酶Mu1(GSTM1)ELISA Kit
鳥嘌呤核苷酸交換因子4 大鼠谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA Kit


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