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納米小孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素

發(fā)表時(shí)間:2021-04-06
納米小孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒 ,英文名: CagA ELISA Kit
細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 ,英文名: CTX ELISA Kit
細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒 ,英文名: IAP ELISA Kit
細(xì)胞凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(PYCARD)ELISA試劑盒 ,英文名: PYCARD ELISA Kit
胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA試劑盒 ,英文名: GCA ELISA Kit
特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒 ,英文名: SMAF ELISA Kit
糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: GlyCAM-1 ELISA Kit
髓性細(xì)胞核分化抗原(MNDA)ELISA試劑盒 ,英文名: MNDA ELISA Kit
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒 ,英文名: TREM-1 ELISA Kit
髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒 ,英文名: MPO-ANCA IgG ELISA Kit
酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF-1 ELISA Kit
酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF/FGF-1 ELISA Kit
酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)ELISA試劑盒 ,英文名: aFGF ELISA Kit
鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 ,英文名: ECF ELISA Kit
嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒 ,英文名: ECP ELISA Kit
嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 ,英文名: Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 ,英文名: pRB ELISA Kit
神經(jīng)細(xì)胞粘著分子(NRCAM)ELISA試劑盒 ,英文名: NRCAM ELISA Kit


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